Порекомендовал бы сперва почитать популярный учебник по микробиологии. Без базовых представлений о том, что и каким образом нужно получить, за дело лучше не браться.
Беглый просмотр практикума Нетрусова показал, что маслянокислое брожение вызывают анаэробные микроорганизмы рода Clostridium. С анаэробными бактериями дело иметь довольно непросто, даже если выделять накопительную или чистую культуру, а тем более, если пытаться получить продукт в заметных количествах. Без навыков работы с микроорганизмами затея, имхо, обречена на провал. Но, как известно, охота хуже неволи. Поэтому сперва немного цитат:
Нетрусов "Практикум по микробиологии"
...
Возбудителями маслянокислого и его разновидности ацетонобутилового брожения являются представители рода Clostridium. Они широко распространены в природе. Их можно выделить из почвы, навоза, силоса, с поверхности зерен злаков и даже из молока и сыра. Для получения накопительных культур видов этого рода можно воспользоваться некоторыми их особенностями. Поскольку споры клостридий терморезистентны, инокулят предварительно пастеризуют. Создавая анаэробные условия, исключают рост всех аэробных бактерий. Клостридиям доступны многие природные субстраты. Они способны гидролизовать полисахариды, белки, нуклеиновые кислоты и сбраживать мономеры, образующиеся в результате гидролиза. На этом основании в качестве источника углерода и энергии для сахаролитических клостридий используют углеводы или полисахариды (чаше всего крахмал), а для пептолитических — аминокислоты или белки. Некоторые клостридии используют молекулярный азот как единственный источник этого элемента, что может стать дополнительным фактором элективности при постановке накопительных культур.
В приложении 4 приводится ряд сред для получения накопительных культур клостридий: картофельная среда с мелом для сахаролитических клостридий, среда Виноградского для клостридий, фиксирующих молекулярный азот и т.д. Накопительную культуру возбудителя ацетонобутилового брожения Clostridium acetobutylicum можно получить на средах с кукурузным (ржаным, картофельным) затором. Пробирки со стерильным 7 —8%-м кукурузным затором заражают зернами хлебных злаков или комочками почвы и пастеризуют на кипящей водяной бане в течение 45 с. Выращивают при 35 — 37 0С в запаянных ампулах или пробирках под слоем вазелинового масла. Для обогащения среды клостридиями делают несколько последовательных пересевов культуры на кукурузный затор, а затем высевают ее на чашки с картофельным агаром и выращивают в анаэробных условиях — в анаэростатах.
...
Кроме того
Среда Виноградского для анаэробных азотфиксаторов из рода Clostridium
Глюкоза 20,0 г; K2HPO4 - 1,0 г; MgSO4*7H2O - 0,5; CaCO3 - 20,0; NaCl - 0,5; MnSO4, FeSO4 - следы; вода дистиллированная - 1000 мл. В среду рекомендуется добавлять дрожжевой экстракт - 10 мг/л и раствор микроэлементов по Федорову - 1 мл/л
Руководство можно скачать например отсюда: http://chemistry-chemists.com/book5/bio ... krobio.pdf
Там можно посмотреть подробности о манипуляциях с микроорганизмами.
Обращаю внимание что:
1) все методики - это лишь лабораторные способы работы с микроорганизмами с выходом продукта в несколько грамм
2) различные виды клостридий имеют разные пути брожения и для маслянокислого подойдут не все, чтобы их выделить их в чистую культуру придется дополнительно изощряться.
3) для работы с микроорганизмами нужна если не полноценная лаборатория, то хороших запас реактивов и смекалки.
|
