Форум Химиков - Энтузиастов. Химия и Химики
http://chemistry-chemists.com/forum/

Высоко-Эффективная Жидкостная Хроматография
http://chemistry-chemists.com/forum/viewtopic.php?f=4&t=3798		 Page 1 of 1
Author:  Ilhom [ 23 Mar 2011 08:59 ]
Post subject:  Вопрос по ВЭЖХ
У нас имеется ВЭЖХ и хотели наладит работу с определением концентрации антибиотиков (аминогликозиды и цефалоспорины) в биологических жидкостях и тканях. Помогите с методиками.
Author:  Volodymyr [ 24 Mar 2011 19:25 ]
Post subject:  Re: Вопрос по ВЭЖХ
Попробуйте найти книгу:
Самсонов Г.В. Сорбция и хроматография антибиотиков
Author:  SeRёг@ [ 22 Sep 2012 19:45 ]
Post subject:  Высоко-Эффективная Жидкостная Хроматография
Работаю с жидкостным хроматографом МилиХром А-02. Хроматографическая колонка почти выработала ресурс, пики очень сильно меняют вид и "отращивают хвосты". Возможно ли вручную сменить сорбент колонки полностью, или частично?
Author:  Volodymyr [ 22 Sep 2012 21:03 ]
Post subject:  Re: Высоко-Эффективная Жидкостная Хроматография
Нет, разумеется: нужна специальная установка. Давление в процессе набивки должно быть в 2 раза выше максимального рабочего.
Author:  SeRёг@ [ 22 Sep 2012 22:24 ]
Post subject:  Re: Высоко-Эффективная Жидкостная Хроматография
То есть 140 атмосфер? А лучше подойдет в качестве консерванта ацетонитрил, или метанол?
Author:  нОль [ 23 Sep 2012 00:31 ]
Post subject:  Re: Высоко-Эффективная Жидкостная Хроматография
Вобще такого делать не стоит. Если заменить, то это будет совсем другая колонка - индексы удердивания изменятся кординально - надо заново поверять колонку.
Author:  Volodymyr [ 23 Sep 2012 00:54 ]
Post subject:  Re: Высоко-Эффективная Жидкостная Хроматография
SeRёг@ wrote:
То есть 140 атмосфер? А лучше подойдет в качестве консерванта ацетонитрил, или метанол?

Консерванта чего?

P.S. Вижу вы понятия не имеете, то такое ВЭЖХ.
Author:  нОль [ 23 Sep 2012 01:44 ]
Post subject:  Re: Высоко-Эффективная Жидкостная Хроматография
SeRёг@ wrote:
Работаю с жидкостным хроматографом МилиХром А-02. Хроматографическая колонка почти выработала ресурс, пики очень сильно меняют вид и "отращивают хвосты". Возможно ли вручную сменить сорбент колонки полностью, или частично?


Показатель выработки ресурка не "длинные хвосты" а отсутствие деления. Если длинные хвосты, то вы банально перегружаете колонку.
Author:  SeRёг@ [ 23 Sep 2012 10:53 ]
Post subject:  Re: Высоко-Эффективная Жидкостная Хроматография
Да, на колонке приходится очень много работать, она уже пол года пашет.
А под консервантом я имею ввиду органику, которая должна оставаться в колонке на время перерыва в работе. Дистиллированную воду в ней оставлять конечно можно, но лучше растворитель ацетонитрил, или метанол, поэтому и спрашиваю, что лучше.
Author:  нОль [ 23 Sep 2012 12:18 ]
Post subject:  Re: Высоко-Эффективная Жидкостная Хроматография
SeRёг@ wrote:
Да, на колонке приходится очень много работать, она уже пол года пашет.
А под консервантом я имею ввиду органику, которая должна оставаться в колонке на время перерыва в работе. Дистиллированную воду в ней оставлять конечно можно, но лучше растворитель ацетонитрил, или метанол, поэтому и спрашиваю, что лучше.

К колонке прилагается бумага с хроматограммой калибровочной смеси, а так же состав жидкости с которой колонка хранится. Полгода - это не много, гарантированый ресурс обычной колонки около 2000 вколов.
Author:  Volodymyr [ 23 Sep 2012 15:11 ]
Post subject:  Re: Высоко-Эффективная Жидкостная Хроматография
Прямая фаза хранится с гексаном или петролейным эфиром, обратная - с ацетонитрилом. Если нет длительных перерывов, колонку оставляют с типичным элюентом (разумеется, если он не агрессивен, что бывает не часто).

А вообще действительно: такие вещи четко указывают в паспорте колонки.

Ни у одного хроматографиста рука не поднимется написать про "прекурсоры" такое:
SeRёг@ wrote:
По поводу уксусной кислоты не уверен, но может влиять её связь с уксусным ангидридом. А ацетонитрил правильно включили в список, поскольку он имеет высокую токсичность и накапливается в организме с неприятными последствиями.

Image
Author:  hongma [ 24 Sep 2012 12:21 ]
Post subject:  Re: Высоко-Эффективная Жидкостная Хроматография
К сожалению, набивка колонок для ВЭЖХ дело очень тонкое :)))) Лучше просто закажите новую колонку. Единственное, что еще можно сделать в домашних условиях, промыть колонку. Если для обращенной фазы - сначала гоните орг растворитель (например, ацетонитрил) с повышением концентрации до 100%. Можно затем попробовать еще после этого прогнать другой растворитель (например, ацетон, спирт, гексан), затем если надо вернуться к ацетонитрилу и постепенно снизить концентрацию до обычно применяемой. Сам пока, слава Аллаху, не делал, но говорят, иногда помогает.
Author:  SeRёг@ [ 16 Jul 2013 18:32 ]
Post subject:  ВЭЖХ
Здравствуйте!!!
Подскажите пожалуйста, как можно отмыть колонку Agilent, 4,6 х 250 мм 5 микрон?
Была вколота в узел ввода проба с концентрацией 0,002 мкг/мл, после этого долго отмывали колонку ацетонитрилом, разбирали узел ввода и все прилегающие к нему шланги. Изопропилового спирта пока нет, работаю недавно, поэтому только заказали, колонке уже 2 года. Как можно быстрее смыть высокую концентрацию?))
Author:  Volodymyr [ 16 Jul 2013 19:48 ]
Post subject:  Re: Высоко-Эффективная Жидкостная Хроматография
Методы отмывки неизвестных проб неизвестны.
Author:  SeRёг@ [ 18 Jul 2013 21:56 ]
Post subject:  Re: Высоко-Эффективная Жидкостная Хроматография
Vladimir wrote:
Методы отмывки неизвестных проб неизвестны.


Проба воды экстрагируется гексаном, после чего гексан упаривается до сухого остатка, этот остаток разводится ацетонитрилом, проба готова, она и вкалывается через узел ввода, вода была высокой степени очистки, это была калибровочная проба, приготовленая из ГСО бензапирена.
Author:  chemister [ 30 Jul 2013 12:20 ]
Post subject:  Re: Высоко-Эффективная Жидкостная Хроматография
Скорее всего дело не в колонке. Я уже сталкивался с такой ситуацией. Оказалось, что шприц отмыть от бензпирена сложнее, чем колонку или порт ввода.
Если вы уверены, что дело в колонке и вам надо выбить бензпирен, то можно ввести несколько раз гексан. Как крайний вариант - обратная промывка (изменяется набивка колонки, могут поехать времена удерживания).
Author:  chaoslw [ 30 Jul 2013 12:30 ]
Post subject:  Re: Высоко-Эффективная Жидкостная Хроматография
chemister wrote:
Скорее всего дело не в колонке. Я уже сталкивался с такой ситуацией. Оказалось, что шприц отмыть от бензпирена сложнее, чем колонку или порт ввода.
Если вы уверены, что дело в колонке и вам надо выбить бензпирен, то можно ввести несколько раз гексан. Как крайний вариант - обратная промывка (изменяется набивка колонки, могут поехать времена удерживания).

А толуолом или бензолом нельзя промыть? Будет поэффективней, чем гексаном.
Author:  SeRёг@ [ 30 Jul 2013 20:53 ]
Post subject:  Re: Высоко-Эффективная Жидкостная Хроматография
chaoslw wrote:
А толуолом или бензолом нельзя промыть? Будет поэффективней, чем гексаном.


К сожалению ни толуола, ни бензола нет, а гексан очень долго вымывается из колонки. Я не знаю где застрял бензапирен, т.к. полностью разобран и промыт узел ввода, поменяна предколонка и фильтр в промывочном клапане. :be:
Да, ещё от изопропанола через какое то время начинает сильно расти давление.
Author:  Volodymyr [ 30 Jul 2013 21:04 ]
Post subject:  Re: Высоко-Эффективная Жидкостная Хроматография
Забавная ситуация: на жидкостный хроматограф ценой несколько десятков тысяч долларов деньги нашлись, а на бензол-толуол стоимостью в несколько долларов - денег нет.
Author:  Иван Николаевич [ 30 Jul 2013 21:37 ]
Post subject:  Re: Высоко-Эффективная Жидкостная Хроматография
Vladimir wrote:
Забавная ситуация: на жидкостный хроматограф ценой несколько десятков тысяч долларов деньги нашлись, а на бензол-толуол стоимостью в несколько долларов - денег нет.

У нас такое сплошь и рядом. :)
Заказы у нас делают раз в год в заявочную кампанию и приходят на следующий. Копеечную детальку можно заказать только на следующий год, так что приходится всячески извращаться.
Да и заказ может не пройти.
Page 1 of 1 All times are UTC [ DST ]
Powered by phpBB © 2000, 2002, 2005, 2007 phpBB Group
http://www.phpbb.com/