Форум Химиков - Энтузиастов. Химия и Химики :: View topic

Определение ферментативной активности пероксидазы
Определение активности пероксидазы основано на образовании окрашенных продуктов при окислении различных фенолов по схеме: Фенол+ Н2О2 → Хинон + 2Н2О.
Реактивы и оборудование: 1/15 М фосфатный буфер, рН 6,5—6,7; 0,1 %-й раствор Н2О2; раствор пирокатехина (0,183 г в 50 мл воды); фарфоровые ступки с пестиками; мерные колбы объемом 50 мл; стеклянные стаканы объемом 100 мл; средние стеклянные воронки; пипетки объемом 2 и 5 мл; автоматические пипетки; бумажные фильтры; ФЭК; кюветы толщиной 2 см.
Для анализа отбирают по 20 пчел из каждого улья, активность фермента определяют в экстракте грудных сегментов по методу Жеребкина М.В.
Навеску биоматериала (50—100 мг) растирают в ступке с небольшим количеством (10—15 мл) фосфатного буфера. Растертую массу переносят количественно в мерную колбу на 50 мл, доводят пробу буфером точно до метки, хорошо перемешивают и оставляют на 10—15 мин. Затем раствор фильтруют через двойной бумажный фильтр или центрифугируют 10 мин при 4000 об/мин. В фильтрате определяют активность фермента на КФК или спектрофотометре при 440 нм. Об активности фермента судят по времени развития окраски до определенного значения оптической плотности (значение D выбирают в зависимости от скорости развития окраски в пределах от 0,25 до 0,4). Для анализа каждой биологической пробы используют три кюветы: одна — контрольная, две — опытные (две аналитические повторности из одной биологической пробы), в которые вносят по 2 мл вытяжки, 2 мл буферного раствора и 2 мл раствора пирокатехина. Затем в контрольную кювету приливают 2 мл воды, а в одну из опытных кювет 2 мл раствора Н2О2 и одновременно включают секундомер. Пробу хорошо перемешивают стеклянной палочкой. Замечают по секундомеру время достижения необходимой оптической плотности. Аналогично производят измерения для второй опытной кюветы.

Author:	MVS [ 22 Sep 2013 18:12 ]
Post subject:	Re: Вопросы по органической химии
Вам SciFinder или Reaxys нужен. Запостите запрос на chemport.ru.

Author:	Симаков [ 23 Sep 2013 20:33 ]
Post subject:	Re: Вопросы по органической химии
Сегодня посоветоваля с химиками органиками на работе, они сказали что то название неочень правильное. За секунду выдали вот это, 1,1-dimethoxy-2-phenylethene, по которому уже можно кое-что отыскать в инете.

Author:	MVS [ 23 Sep 2013 21:16 ]
Post subject:	Re: Вопросы по органической химии
Искать-то по структуре надо, а не по названию. "1,1-dimethoxy-2-phenylethene" - неправильное название. Сами смотрите - даже метоксигруппы при разных атомах углерода.

Author:	O'Bu [ 24 Sep 2013 11:12 ]
Post subject:	Re: Вопросы по органической химии
Ну подумаешь, потеряли за секунду две метиленовых группы Академик Ландау, по воспоминаниям, на такие вопросы вообще вскрикивал "Не на того напали!" и убегал. 1,1-dimethoxymethyl-2-phenylethene, только это всё равно что ЕГО называть гидроксометилметаном. Положено выбирать главную цепь максимальной длины, т.е. даже если предположить, что ChemSketch зря считает бензольное кольцо старше двойной связи, то получится 1-phenyl-2-methoxymethyl-3-methoxypropene.

Author:	Симаков [ 27 Sep 2013 14:48 ]
Post subject:	Re: Вопросы по органической химии
Это просто ужасно. Так и не удалось найти ничего по этому соединению. В таком случае, прошу помочь в написании реакции получения этого вещества. Пытался найти на русском языке что-то по нему, так и не удалось ничего. Прошу отозваться.

Форум Химиков - Энтузиастов. Химия и Химики http://chemistry-chemists.com/forum/

Вопросы по органической химии http://chemistry-chemists.com/forum/viewtopic.php?f=4&t=379	Page 35 of 52

Author:	MVS [ 27 Sep 2013 15:37 ]
Post subject:	Re: Вопросы по органической химии
Симаков wrote: Это просто ужасно. Так и не удалось найти ничего по этому соединению. В таком случае, прошу помочь в написании реакции получения этого вещества. Пытался найти на русском языке что-то по нему, так и не удалось ничего. Прошу отозваться. Запостите запрос на chemport.ru. В соответствующем разделе, попросите сделать поиск по структуре с SF или Reaxys. На вскидку - бензальдегид с малоновым эфиром, затем восстановление ЛАГом и алкилирование спиртовых групп MeI.

Author:	MVS [ 30 Sep 2013 12:24 ]
Post subject:	Re: Вопросы по органической химии
Рекомендация та же. Обычное алкилирование ацетилацетона бензилхлоридом.

Author:	олимпиадник [ 29 Oct 2013 23:21 ]
Post subject:	Re: Вопросы по органической химии
Доброе время суток уважаемые форумчане ......хочу спросить как експериментально устанавливается факт существования таутомеров ????

Author:	Papai [ 30 Oct 2013 08:01 ]
Post subject:	Аллицин и Глицерни
Подскажите результат растворения аллицина в глицерине? формула аллицина C6H10OS2 формула глицерина C3H8O3 И чем принципиально отличается это C6H10S3 от вещества,полученного в результате растворения?

Author:	chemlab [ 30 Oct 2013 15:00 ]
Post subject:	Re: Аллицин и Глицерни
Papai wrote: Подскажите результат растворения аллицина в глицерине? формула аллицина C6H10OS2 формула глицерина C3H8O3 И чем принципиально отличается это C6H10S3 от вещества,полученного в результате растворения? Результат любого растворения - раствор. Почему Вы думаете, что здесь будет иначе?

Author:	Upsidesium [ 30 Oct 2013 16:27 ]
Post subject:	Re: Вопросы по органической химии
олимпиадник wrote: Доброе время суток уважаемые форумчане ......хочу спросить как експериментально устанавливается факт существования таутомеров ???? Прототропные таутомеры например, с помощью протонного магнитного резонанса (ПМР).

Author:	Volodymyr [ 30 Oct 2013 17:01 ]
Post subject:	Re: Вопросы по органической химии
1. Спектроскопическими методами - ИК, ПМР и т.п. (по сигналам, характерным для групп каждого из таутомеров) 2. Качественными реакциями на функциональные группы 3. В некоторых случаях удавалось разделить таутомеры при охлаждении Papai wrote: Подскажите результат растворения аллицина в глицерине? формула аллицина C6H10OS2 формула глицерина C3H8O3 И чем принципиально отличается это C6H10S2 от вещества,полученного в результате растворения? Аллицин неустойчив сам по себе и в глицериновом растворе тоже будет распадаться.

Author:	феерверкер [ 03 Dec 2013 10:40 ]
Post subject:	Re: Вопросы по органической химии
Копаясь в подвале института случайно нашёл бутылку с остатками толуола (она была хорошо заныкана среди барахла, иначе бы от неё уже избавились). Взял - никогда не знаешь, что пригодится (в продаже толуол встречать не приходилось, однако не искал). Изготовлен он в 1987 году, и имеет срок хранения 1 год. Представляет из себя мутную жидкость тёмно-жёлтого цвета, на дне катается относительно крупная капля воды. Всего толуола мл 150 - 200, не много, но кое-что. Решил его очистить. В теории вроде ничего не противоречит его перегонке, но как будет на практике. На сколько легко его пары конденсируются при охлаждении? Attachment: image.jpg [ 173.7 KiB \| Viewed 12192 times ]

Author:	Volodymyr [ 03 Dec 2013 10:47 ]
Post subject:	Re: Вопросы по органической химии
Конденсируется толуол примерно, как вода. Особенность в том, что он горюч примерно, как бензин. Если честно, внешний вид меня смущает: толуол ли это? В бутылку с этикеткой могли налить что угодно.

Author:	AF [ 03 Dec 2013 14:59 ]
Post subject:	Re: Вопросы по органической химии
Не похоже на старый толуол совсем. У толуола характерный "ароматический" запах, а у обводненного толуола характерная кривая кипения, так что перегоняя Вы сразу поймете что у Вас такое. При атм. давлении сначала должен гнаться азеотроп с водой (мутный, BP=88C) а затем чистый толуол (прозрачный, BP=110C) Успеха.

Author:	феерверкер [ 03 Dec 2013 16:18 ]
Post subject:	Re: Вопросы по органической химии
AF wrote: Не похоже на старый толуол совсем. У толуола характерный "ароматический" запах, а у обводненного толуола характерная кривая кипения, так что перегоняя Вы сразу поймете что у Вас такое. При атм. давлении сначала должен гнаться азеотроп с водой (мутный, BP=88C) а затем чистый толуол (прозрачный, BP=110C) Успеха. Да, судя по запаху (с ваших слов) и горению (поджигал в чайной ложке - горит далеко не как бензин, пламя распространяется быстро, но не очень, горит неспешно (примерно как уайт-спирит), в один момент появилась копоть, но сразу пропала). Так что, видимо, там просто какой-то странный лак (жидкий, и от времени не загустел). Понятия не имею что там такое, но на толуол действительно похоже крайне слабо. Так что извините...

Page 35 of 52	All times are UTC [ DST ]
Powered by phpBB © 2000, 2002, 2005, 2007 phpBB Group http://www.phpbb.com/

Author:	феерверкер [ 03 Dec 2013 12:22 ]
Post subject:	Re: Вопросы по органической химии
Vladimir wrote: Конденсируется толуол примерно, как вода. Особенность в том, что он горюч примерно, как бензин. Если честно, внешний вид меня смущает: толуол ли это? В бутылку с этикеткой могли налить что угодно. На счёт того, что там на самом деле я не знаю (настоящий толуол видеть приходилось только на видео и картинках). Жидкость более подвижна, чем вода, но до бензина ей далеко. С водой не смешивается (судя по капле воды на дне). Пахнет довольно сильно, запах почти как у многих лаков (для покраски древесины), но последние всегда имеют густую консистенцию. Попробую чуток поджечь, посмотрю как будет гореть.

Author:	Asakyra7712 [ 06 Jan 2014 19:10 ]
Post subject:	Re: Вопросы по органической химии
Здравствует помогите с расчетом активности фермента. Расчет активности ведут по формуле где A — активность, выраженная в относительных единицах на 1 г сырой массы за 1 с; D — зарегистрированная в опыте оптическая плотность; t — время, с; d— толщина кюветы, см; α, β, γ— факторы разведения: α — отношение количества жидкости, взятой для приготовления вытяжки, мл, к массе навески, г; β — степень дополнительного разведения вытяжки после центрифугирования (если это требовалось); γ — степень постоянного разведения вытяжки в кювете (в условиях опыта γ = 4). Не уверен в правильности понимания α. α, β, γ— факторы разведения:остальные данные есть. Тоесть это моя навеска 0,085г и разведение после растирания в буфере на 35 мл. То есть 0,085/35= или на оборот 35/0,085= Сама работа. Определение ферментативной активности пероксидазы Определение активности пероксидазы основано на образовании окрашенных продуктов при окислении различных фенолов по схеме: Фенол+ Н2О2 → Хинон + 2Н2О. Реактивы и оборудование: 1/15 М фосфатный буфер, рН 6,5—6,7; 0,1 %-й раствор Н2О2; раствор пирокатехина (0,183 г в 50 мл воды); фарфоровые ступки с пестиками; мерные колбы объемом 50 мл; стеклянные стаканы объемом 100 мл; средние стеклянные воронки; пипетки объемом 2 и 5 мл; автоматические пипетки; бумажные фильтры; ФЭК; кюветы толщиной 2 см. Для анализа отбирают по 20 пчел из каждого улья, активность фермента определяют в экстракте грудных сегментов по методу Жеребкина М.В. Навеску биоматериала (50—100 мг) растирают в ступке с небольшим количеством (10—15 мл) фосфатного буфера. Растертую массу переносят количественно в мерную колбу на 50 мл, доводят пробу буфером точно до метки, хорошо перемешивают и оставляют на 10—15 мин. Затем раствор фильтруют через двойной бумажный фильтр или центрифугируют 10 мин при 4000 об/мин. В фильтрате определяют активность фермента на КФК или спектрофотометре при 440 нм. Об активности фермента судят по времени развития окраски до определенного значения оптической плотности (значение D выбирают в зависимости от скорости развития окраски в пределах от 0,25 до 0,4). Для анализа каждой биологической пробы используют три кюветы: одна — контрольная, две — опытные (две аналитические повторности из одной биологической пробы), в которые вносят по 2 мл вытяжки, 2 мл буферного раствора и 2 мл раствора пирокатехина. Затем в контрольную кювету приливают 2 мл воды, а в одну из опытных кювет 2 мл раствора Н2О2 и одновременно включают секундомер. Пробу хорошо перемешивают стеклянной палочкой. Замечают по секундомеру время достижения необходимой оптической плотности. Аналогично производят измерения для второй опытной кюветы.

Author:	Asakyra7712 [ 08 Jan 2014 09:53 ]
Post subject:	Re: Вопросы по органической химии
Вопрос решен.